2. 沉淀

将样品体积的 3-4 倍的裂解溶剂添加到孔中以沉淀蛋白质。

• 推荐溶剂

• 1% 甲酸的乙腈溶液

替代溶剂：1% 甲酸的甲醇溶液

3. 混合

在洗脱前混合两种溶液以使蛋白质沉淀。

选项 1 - 吸液（推荐）：

用手动、自动移液器或自动液体处理系统上下吸液 3 – 4 次。

选项 2 - 涡旋

建议采用高速混合以获得最佳的均质蛋白质沉淀，同时确保孔之间不会发生飞溅和污染风险。

4. 洗脱

与传统的松散填充产品相比，Microolute^TM PLR 不需要高真空或压力即可高效、均匀地洗脱样品*。

对于真空：

施加低于 - 0.1 bar 的真空，持续3分钟或直至样品洗脱完毕。

对于正压：

施加小于 3 PSI 的正压，持续3分钟或直至样品洗脱完毕。

注意：如果磷脂去除或清理不充分，请降低真空或压力以减慢流速。

*较高的洗脱真空或压力可能导致磷脂去除效率低下，并可能增加其他基质成分（例如蛋白质）渗透到样品中的风险。

5. 分析

将洗脱液直接注入到 LC 中，进样前稀释或蒸发洗脱液以在进样前重新溶解为更适合分析的溶剂。